血清保存全攻略!避开这6大坑,细胞养得棒!

2025-04-20 18:25:21 阅读量:44

1. 冷冻保存:温度选对,空间留够!

长期存:20℃~70℃低温冰箱,避免反复冻融(分装小份更省心)。

短期用:4℃存放≤1个月,超时有效成分易降解!

防爆管秘诀:灌装时预留10%空间(血清结冰体积膨胀),避免炸瓶或污染。


2. 过滤禁忌:别多此一举!

出厂已灭菌:市售血清无需二次过滤,直接使用即可。

悬浮物处理:若发现杂质,将血清与培养基混合后过滤,禁止直接过滤血清(易堵塞滤膜)。


3. 解冻玄学:三步化冻法

口诀:低温→冷藏→室温,摇匀再分装!

1. 20℃→4℃:冰箱过渡解冻24小时;

2. 4℃→室温:完全溶解后轻摇混匀(避免气泡);

3. 拒绝暴力解冻:禁止20℃直丢37℃水浴(蛋白质凝集变浑浊)!


4. 热灭活:能不做就不做!

操作条件:56℃水浴30分钟,全程摇晃均匀。

副作用警告:

补体灭活(适用特殊实验,如避免免疫细胞误杀);

显著增加沉淀物,降低血清品质!


5. 高温禁区:37℃是“变质加速器”

解冻后速用:室温放置≤2小时,37℃存放≤30分钟;

浑浊=警报:血清变混说明蛋白质变性,立即停用!


6. 沉淀物鉴别:别慌!


类型
成因
处理方式
状物
脂蛋白变性/纤维蛋白析出
离心3000rpm×5分钟去除
小黑点
热灭活后颗粒聚集
不影响细胞生长,但怀疑污染立即换批次


保存口诀

低温存、分装冻、三步化、慎热灭;

沉淀分清小黑点,高温浑浊快告别!

用好这6招,血清活性稳如泰山!



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